NFkB（p65）過度表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系

 NFkB由Rel 家族中的NFkB1（p50），NFkB2 （p52），RelA （p65），RelB，和c-Rel （Rel）5個(gè)同質(zhì)和異質(zhì)二聚體組成。主要的RelA（p65）/p50二聚體游離于未受IKBs刺激的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。信號(hào)感應(yīng)導(dǎo)致IkB離解和降解，并使NFkB復(fù)合體激活。被激活的NFkB復(fù)合體轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核,結(jié)合在DNA kB結(jié)合基序，然后啟動(dòng)目標(biāo)基因轉(zhuǎn)錄。NFKB在許多生物過程發(fā)揮了重要作用，如分化、增殖和凋亡。NFkB的功能障礙可引起許多疾病，如炎癥和癌癥。Signosis的NFkB（P65）過表達(dá)穩(wěn)定COS-7細(xì)胞系，可有效地用于研究NFkB通路。
A.優(yōu)點(diǎn)：
持續(xù)穩(wěn)定——野生型p65蛋白在細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)，避免試驗(yàn)差異；
節(jié)省時(shí)間——細(xì)胞系可即用于研究p65信號(hào)通路；
B.原理：
         細(xì)胞系通過NFkB （p65） CMV myc標(biāo)簽表達(dá)載體轉(zhuǎn)染建立。該表達(dá)載體帶潮霉素篩選標(biāo)記，用潮霉素篩選，潮霉素的抗性克隆再用NFkB （p65）和myc標(biāo)簽表達(dá)篩選，選擇有高表達(dá)的克隆，增殖成為細(xì)胞系。