核酸提取試技術(shù)的發(fā)展之路

　　以固相吸附物載體為基礎(chǔ)的新型核酸提取方法主要有：旋轉(zhuǎn)離心柱提取法、玻璃珠吸附法、二氧化硅基質(zhì)法、陰離子交換法和納米磁珠提取法。這類方法的操作步驟主要可分為三個部分：（1）利用裂解液促使細胞破裂，使核酸釋放于液相中，（2）利用載體對核酸的較強親和力和吸附力，將釋放出來的核酸特異性地結(jié)合在特定載體上，使蛋白質(zhì)、多糖和脂類等其它雜質(zhì)依然游離于液相中，隨上清的移走而被除去，（3）通過調(diào)節(jié)洗脫液的離子強度和pH值，將吸附于載體上的核酸洗脫下來而得到純化后的核酸。

　　其中，離心柱法DNA提取試劑盒以其低廉的價格和相對便捷的操作，在市面上應(yīng)用得較為廣泛，但隨著對DNA提取需求量的增多，離心柱法提取DNA的缺點也日益凸顯。樣本需求量大，損失多，對于樣本無能為力等成為離心柱法無法避免的缺點，同時離心柱法DNA提取過程需要反復(fù)離心，不便于高通量、自動化操作，與現(xiàn)代生物學(xué)實驗要求格格不入。為了適應(yīng)現(xiàn)代分子生物學(xué)高通量，高靈敏度，自動化操作的發(fā)展需求，20世紀90年代，磁珠法DNA提取技術(shù)由此誕生，其原理是磁珠表面帶有特定的活性基團，在特定條件下能夠與核酸進行特異性可逆結(jié)合，同時利用磁珠自身具備的磁響應(yīng)能力，在外加磁場的作用下可方便地進行定向移動與富集，進而實現(xiàn)對核酸的分離純化。