一文讀懂酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)的概念及原理

　　

　　一、基本概念

　　1、免疫：籠統(tǒng)地概括起來(lái)，免疫就是人和動(dòng)物機(jī)體防御、排除外來(lái)物質(zhì)(異物)進(jìn)人體內(nèi)，同時(shí)識(shí)別和清除體內(nèi)死亡、變性物質(zhì)和平定體內(nèi)叛亂分子突變細(xì)胞，以保護(hù)和穩(wěn)定自身的防護(hù)機(jī)制。

　　2、抗原：抗原是指那些能夠誘導(dǎo)機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，產(chǎn)生抗體和致敏效應(yīng)淋巴細(xì)胞，并在體內(nèi)外與之特異性結(jié)合，發(fā)生免疫反應(yīng)的物質(zhì)。

　　3、抗體：是能與相應(yīng)的抗原專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)分子，和機(jī)體其他生物大分子一樣是細(xì)胞的產(chǎn)物，分泌到體液中或表現(xiàn)在細(xì)胞表面上。

　　4、抗原、抗體反應(yīng)：抗原和抗體在體外的反應(yīng)亦稱血清學(xué)反應(yīng)。這類反應(yīng)可借助免疫學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)。

　　

　　二、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)基本原理：

　　①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；

　　②抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性；

　　③酶標(biāo)抗體與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例。

　　以雞敗血支原體（Mg）抗體檢測(cè)為例：試驗(yàn)用Mg抗原包被96孔板。被檢樣品加入包被孔后的孵育階段，血清樣品中的特異性Mg抗體與包被的抗原反應(yīng)形成復(fù)合物，經(jīng)過(guò)洗滌，為結(jié)合的物質(zhì)被洗掉，微孔加入酶標(biāo)抗體，酶標(biāo)抗體可以與吸附在包被孔內(nèi)的雞抗體結(jié)合。反應(yīng)后進(jìn)行洗滌，為結(jié)合的酶標(biāo)抗體被洗去。加入酶底物后的顏色反應(yīng)與血清中的Mg抗體的數(shù)量直接相關(guān)。