四大重要特點(diǎn)讓DNA聚合酶得到了改進(jìn)

　　熱穩(wěn)定性

　　熱穩(wěn)定性是指DNA聚合酶能夠耐受高溫的能力。不同的DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性差異較大，一般通過半衰期來體現(xiàn)。由于熱循環(huán)是DNA擴(kuò)增重復(fù)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)條件的關(guān)鍵特征，因此，所使用DNA聚合酶的熱穩(wěn)定性非常重要。盡管初來自于嗜熱菌菌株的TaqDNA聚合酶可耐受相對(duì)較高的溫度，但是其半衰期在90°C以上時(shí)明顯縮短。當(dāng)使用長(zhǎng)時(shí)間高溫使具有二級(jí)結(jié)構(gòu)和富含GC序列的DNA變性時(shí)，這一缺陷便成為一大難題。

　　保真度

　　保真度是指DNA聚合酶復(fù)制DNA模板的能力。部分DNA聚合酶具有3’-5’的核酸外切酶活性，能夠校正錯(cuò)誤堿基。保真度的高低可通過錯(cuò)配率來體現(xiàn)。DNA聚合酶的校正能力決定了保真度，會(huì)影響DNA序列復(fù)制的準(zhǔn)確性。因此，高保真DNA聚合酶就是具有強(qiáng)校正活性的酶。DNA聚合酶準(zhǔn)確復(fù)制DNA序列（即獲得無錯(cuò)誤序列）的能力對(duì)分子克隆、測(cè)序和定點(diǎn)突變等實(shí)驗(yàn)應(yīng)用至關(guān)重要。

　　擴(kuò)增速度

　　擴(kuò)增速度是指在延伸時(shí)，DNA聚合酶向DNA新鏈中摻入核苷酸的速率。擴(kuò)增速度除與DNA聚合酶有關(guān)，還會(huì)受到延伸溫度，緩沖液及模板復(fù)雜程度等的影響。

　　特異性

　　特異性是指DNA聚合酶在PCR過程中只擴(kuò)增目的片段的能力。為了提高PCR特異性，常通過抗體法或配體法等方式對(duì)DNA聚合酶進(jìn)行修飾，使酶活性在低溫條件下封閉，減少非特異性延伸和擴(kuò)增。